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P-Selectin,小鼠P選擇素ELISA試劑盒技術指導

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價格： 4900

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采購度：156 原產(chǎn)地：美洲

發(fā)布時間：2018/3/7 15:24:22

產(chǎn)品簡介：P-Selectin,小鼠P選擇素ELISA試劑盒技術指導用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠P選擇素（P-Selectin）的含量。

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標簽：P-Selectin試劑盒 小鼠P選擇素 ELISA試劑盒技術指導

詳細信息

P-Selectin,小鼠P選擇素elisa試劑盒技術指導

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠P選擇素（P-Selectin）的含量。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠P選擇素（P-Selectin）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠P選擇素（P-Selectin）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

P-Selectin,小鼠P選擇素ELISA試劑盒技術指導的抑制性測定法操作步驟
本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體，經(jīng)洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。經(jīng)孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b，而這次加入的抗體b于次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的，但不是用同種動物免疫制備的，否則可出現(xiàn)非特異性反應。經(jīng)孵育洗滌后，再加酶標記抗b抗體，再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色進行測定。這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此，放大的倍數(shù)更高，故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時避免標記特異性抗體，而另一優(yōu)點是只要標記一種抗抗體，即可達到多種應用。
用于測定抗原的尚有第4種叫做抑制性測定法（見圖），它是先用抗原包被固相載體，然后分為二組，一組加入用參考抗體和被檢標本混合孵育后的混合溶液，假如標本中不含抗原，則參考抗體未被結合。因此它可以和包被于固相載體上的抗原結合。如標本中含有抗原，則抗原先與參考抗體結合，故參考抗體不再與包被于固相載體上的抗原結合。對加入酶結合物（抗球蛋白）和底物僅顯示剩余結合的抗體量。再與另一組不加待檢標本的參考系統(tǒng)比較，被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原量成比例，二者之差，即為欲測抗原的量。
被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原的量成比例，二者之差即為欲測抗原的量。

ELISA常用的幾種方法
一、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
二、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面；
加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
三、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面；
加抗體, 形成抗原-抗體復合物；
加酶標抗體；
加底物。測定底物的降解量＝抗體量。

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更新時間：2024/11/20 9:12:24

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